对象。系统性尼古丁已被假设导致椎间盘退变,进而通过胆碱能受体介导的过程减少对椎间盘的血管供应。另一种可能的机制可能是通过对椎间盘细胞的直接调节作用。在本研究中,作者通过直接抑制II型胶原蛋白的蛋白多糖合成和基因表达来验证尼古丁对髓核细胞不利的假设(I期研究)。他们还评估了尼古丁抑制骨形态发生蛋白(BMP) - 2诱导的细胞外基质上调的假设(II期研究)。
开云体育世界杯赔率方法。从大鼠腰椎间盘髓核中分离细胞,并单层培养。培养基用尼古丁和/或重组人(rh)BMP-2处理7天。磺化糖胺聚糖(SO4采用1,9-二甲基亚甲基蓝(DMMB)法定量培养基中-GAG的含量。采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和实时荧光定量PCR对ⅰ型和ⅱ型胶原蛋白、Sox9和甘油醛-3-磷酸脱氢酶进行基因检测。在I期研究中,比较尼古丁处理(100µg/ml)和未处理的细胞。尼古丁处理组ⅱ型胶原和Sox9的s-GAG生成和信使RNA (mRNA)显著降低。在II期研究中,比较了五组:1)未治疗;2)仅rhBMP-2 (100 ng/ml);和3-5)给予rhBMP-2 (100 ng/ml),并增加尼古丁剂量(1[第三组],10,[第四组],100[第五组]µg/ml)。所以的4与rhBMP-2组相比,10µg/ml和100µg/ml尼古丁联合rhBMP-2组-GAG生成、II型胶原和Sox9 mRNA表达显著降低。
结论。本研究的结果提出了尼古丁可能通过直接作用于髓核细胞,可能通过拮抗BMP-2的作用,促进椎间盘退变过程的可能性。