Cartilage是一种特殊类型的结缔组织。根据其在体内的位置,软骨的功能分为生长板软骨、纤维软骨或关节软骨。生长板软骨是短暂的,在发育过程中通过软骨内成骨过程负责长骨延长,该过程包括间充质细胞-软骨细胞分化(软骨发生)、软骨细胞增殖和基质合成、软骨细胞成熟为肥厚软骨细胞以及骨替代肥厚组织。关节软骨覆盖在长骨的末端,在出生后的整个生命中都处于稳定的状态。5,11,29,30.,44然而,在骨关节炎期间,关节软骨细胞再现了软骨内成骨过程中生长板中正常发生的成熟过程。16,40,45导致关节软骨退化。纤维软骨独特地位于特定的关节空间内,以确保平滑的关节和应力吸收。例如,膝关节的半月板和椎间关节的椎间盘是人体主要的纤维软骨组织。它们具有复杂的几何形状和高度有序的矩阵结构,这是组织正常功能所必需的。
半月板在其细胞组成和微观结构上表现出区域和区域差异。15,18,35半月板呈楔形,位于胫骨关节面周围。24半月板外三分之二为纤维软骨,纤维母细胞呈梭状,主要表达I型胶原蛋白和少量II型胶原蛋白及蛋白多糖。半月板的内三分之一由关节软骨组织组成,其中圆形的软骨细胞平衡缓慢的基质周转。36,39
与半月板类似,椎间盘在不同区域的细胞表型和基质结构也各不相同。9,10,31,34椎间盘由一个纤维环、一个髓核核心和2个终板组成。外环由高度有序的胶原片组成,其中I型胶原纤维与细长的成纤维细胞排列在一起。34内环与外环不同,含有球形细胞,层间距更宽,II型胶原蛋白和蛋白多糖含量更高。9,31中央细胞核是一种水凝胶状组织,主要由蛋白聚糖和II型胶原蛋白组成。核中高度带负电荷的糖胺聚糖提供渗透特性,使核能够在抗压缩载荷下保持高度和膨胀。23,42产生和维持核基质的核细胞是较大的脊索细胞群和相对较小的软骨细胞样细胞。23终板位于椎间盘和相邻椎骨的关节面,20.是一层关节软骨样组织,内含软骨细胞样细胞,嵌入软骨基质内。椎环、椎核和终板相互连接,形成脊柱运动节段最重要的部分。
腰痛是一个非常常见的临床问题,通常是由腰椎间盘退变引起的。12,14,20.椎间盘退变早在生命的第二个十年就开始了,是衰老的必然结果。4因此,很难区分椎间盘老化和退变的生理过程;然而,当观察到椎间盘的结构失效并伴有加速或恶化的衰老迹象时,椎间盘被认为是退行性椎间盘。2椎间盘老化/退变的过程已经在宏观和组织学水平上得到了清楚的描述。例如,随着年龄的增长,细胞核中的水分含量减少,胶原蛋白含量增加。裂缝和撕裂首先发生在细胞核和终板,然后延伸到环空,在老化/退变的椎间盘中经常发现环核边界和终板浅层的丢失、成纤维细胞-软骨细胞分化、软骨细胞克隆和环向核的迁移。在椎间盘退变的晚期,结构失败的修复导致瘢痕或纤维化组织的形成,这一过程导致结构失败的进展而不是修复。4,7,27,33关于椎间盘老化或结构破坏进程的调节,我们所知甚少。已知当成纤维细胞持续高表达CTGF时,结缔组织生长因子(CTGF)及其表达诱导剂转化生长因子-β (tgf -β)是皮肤创面愈合和纤维化形成过程中结缔组织再生的关键因子。17,19然而,在椎间盘老化或退变过程中,CTGF的表达是在退行性椎间盘细胞中改变,还是在易成为退行性或纤维化组织的细胞中改变,目前尚不清楚。
我们之前已经证明,在II型胶原α 1的控制下,E3泛素连接酶Smurf2的异位表达(Col2a1)启动子诱发成人膝关节骨关节炎Col2a1-Smurf2转基因小鼠。45我们发现当关节软骨在Col2a1-Smurf2转基因小鼠的半月板也发生了类似的变化。因此,我们认为Col2a1-Smurf2转基因小鼠可能表现为椎间盘退变表型。本研究的目的是表征Smurf2的异位表达Col2a1小鼠的-启动子工作细胞改变了椎间盘表型及其相关机制。
开云体育世界杯赔率
Col2a1-Smurf2转基因小鼠
我们之前生成了3行Col2a1-Smurf2通过克隆flag标记的人Smurf2 cDNA下游II型α 1 (Col2a1)启动子。45我们最近使用的材料和方法与之前的研究类似,开云体育世界杯赔率45包括flag标记的Smurf2 cDNA (Addgene)和Col2a1启动子(Yoshihiko Yamada, NIH/NIDCR),除了Smurf2 cDNA片段被注射到受精的C57BL/6卵母细胞(Cyagen Biosciences)。Smurf2异位表达的细胞Col2a1启动子的Col2a1-Smurf2用抗flag M2抗体(Sigma)免疫染色鉴定转基因小鼠。染色阳性细胞为软骨细胞、骨前体细胞和纤维软骨细胞,与先前的报道一致。37,41,45
组织和免疫组织化学分析样品的处理
在小鼠中进行的所有程序均按照机构动物护理和使用委员会批准的动物方案中提出的政策和指导方针进行。如前所述,制备成年小鼠膝关节和腰椎组织进行组织学检查。43,45简单地说,成年小鼠膝关节和腰椎组织固定,脱钙,并包埋在石蜡或最佳切割温度化合物(OCT)中。分别取5 μm厚的石蜡切片和10 μm厚的OCT切片,在膝关节和椎体正中矢状区每隔30 μm取4-6个连续矢状石蜡切片。每组至少6只;如前所述,每个样品的3个切片用红素- o - fast绿色(蛋白多糖为红色)和阿利新蓝- h和E(软骨为蓝色)染色。44,45表型根据腰椎间盘年龄相关变化的分类进行评估。7如前所述,对OCT切片进行抗ctgf (ab6992, abcam)染色。45
Western Blot分析
用放射免疫沉淀法(RIPA)缓冲液从未培养的新鲜分离的盘状细胞中提取蛋白质。根据以往的报道,我们采用了一种改良的方法分离椎间盘细胞。3.,13简单地说,在解剖显微镜下,每组6只小鼠分离腰椎间盘,用0.2% (w/v) Pronase (Roche)在37°C下消化1小时,然后用0.02% (w/v) collagenase (Sigma)在DMEM/F-12中消化。通过70 μm过滤器过滤消化后的混合物,收获细胞。10-15 μg的蛋白通过SDS-PAGE分离,抗ctgf抗体(ab6992, abcam)印迹,BioMax XAR膜(Carestream)曝光显示。
结果
野生型和半月板的老化和退化Col2a1-Smurf2转基因小鼠
我们之前的研究表明,异位表达的Smurf2驱动Col2a1启动子诱导成人膝关节软骨退变和骨赘形成Col2a1-Smurf2转基因小鼠。43,45同时,我们还发现这些小鼠的半月板退行性变的进展速度与关节软骨退行性变相似(图1).45具体来说,野生型(WT)小鼠在2月龄和6月龄时,半月板内三分之一的关节软骨样组织含有圆形软骨细胞,这些软骨细胞嵌入软骨基质(图1A和C).但在2月龄时,蛋白聚糖含量下降,软骨基质相应部位出现钙化Col2a1-Smurf2转基因小鼠(图1 b),这些表型变化在6个月大的转基因小鼠中有所进展。如:软骨基质蛋白聚糖含量减少、钙化区域扩大,半月板软骨表面出现裂隙(图1 d).8月龄WT小鼠半月板内关节软骨样组织出现蛋白多糖减少和基质钙化(图1 e),其程度与2个月大转基因小鼠(图1,E与B的比较).在年龄匹配的Col2a1-Smurf2然而,转基因小鼠的内三分之一区域,正常情况下是软骨状的,却变成了纤维化组织,类似于半月板根部的纤维化组织(图1 f).软骨形成和软骨内成骨(图1 f)常见于外纤维软骨区,并导致半月板外区扩大和关节周围的骨赘。45这些数据表明:1)在WT小鼠中,半月板变性是一个与年龄相关的过程;2) Smurf2异位表达Col2a1 -启动子工作细胞加速与年龄相关的半月板退化Col2a1-Smurf2转基因小鼠。
椎间盘老化和退变在WT和Col2a1-Smurf2转基因小鼠
考虑到Smurf2在Col2a1 -启动子工作细胞诱导半月板变性Col2a1-Smurf2在转基因小鼠中,半月板与椎间盘的相似性促使我们对这些转基因小鼠椎间盘的表型变化进行研究。我们从不同年龄的小鼠身上采集腰椎,并对标本进行组织学和免疫组织化学分析。2月龄WT小鼠外环基质致密排列成片状,细胞呈梭状(图2一个).9内环内基质排列松散,细胞呈球形。20.细胞核内基质为凝胶状组织,有松散堆积的II型胶原原纤维。终板是一层关节软骨样组织,其表层含有II型胶原蛋白、蛋白聚糖和小扁平细胞(图2一个;也看到图4摄氏度).与2月龄WT小鼠的椎间盘比较,年龄相匹配Col2a1-Smurf2转基因小鼠表现出内环、细胞核和终板浅区蛋白多糖含量降低和终板厚度增加(图2 b).6月龄WT小鼠的椎间盘结构和基质成分与2月龄WT小鼠相似(图2 c).在年龄匹配的Col2a1-Smurf2然而,转基因小鼠的细胞核和终板中经常检测到环撕裂和基质破裂(图2 d).内环和细胞核中的蛋白多糖含量与WT对照体相比显著增加(图2,对比D和C),这通常被认为是开始修复的尝试,2类似于这些转基因小鼠关节软骨的改变。45在10个月或更大的WT小鼠中,超过三分之一的小鼠表现出某种程度的椎间盘退变(老化)。例如,在10个月大的小鼠(n = 3 / 8)中检测到内环和细胞核中蛋白多糖含量的增加(图2 e), 12月龄小鼠出现环撕裂和核基质破裂(n = 3 / 6) (图2 g).10- 12月龄WT小鼠衰老椎间盘的这些表型变化与6月龄小鼠相似Col2a1-Smurf2转基因小鼠(图2,E和G与D的比较).与10- 12月龄WT小鼠的局灶性和轻度椎间盘退变(椎间盘老化)相反,10月龄Col2a1-Smurf2转基因小鼠表现出整个细胞核降解(图2 f).到12个月时,核退化已扩展到终板以外的椎体钙化区(图2 h).这些数据表明椎间盘退变是一个与年龄相关的过程,6和Smurf2的异位表达Col2a1-启动子工作细胞大大加速了细胞的退化过程Col2a1-Smurf2转基因小鼠。
异常软骨细胞分化和成熟导致椎间盘退变的进展Col2a1-Smurf2转基因小鼠
为了更好地了解椎间盘退变的过程,从10月龄时的核破裂到12月龄时的椎间盘扩展到终板以外的椎体Col2a1-Smurf2在转基因小鼠中,我们对11月龄小鼠的连续椎间盘切片进行组织学检查。终板中的软骨细胞增殖并形成柱状结构并迁移到细胞核内(图3B和B’).迁移组织前部出现裂口和撕裂,裂口和撕裂下方开始发育瘢痕/纤维化组织(图3 b”).同样,内环的软骨细胞样细胞也发生增殖,形成细胞团(图3C′和D′),转化为肥大的软骨细胞样细胞并迁移到细胞核中。在含有许多肥厚细胞的“肥厚样区”内发生大面积撕裂或组织破裂,相邻形成纤维化组织(图3C′和D′).与内环和终板软骨形成的同时,外环的细胞通常呈成纤维细胞样,主要表达I型胶原,分化为软骨细胞样细胞,表达软骨基质蛋白,如蛋白聚糖和II型胶原(无花果2 h。,3 c,4 f).在八个月大Col2a1-Smurf2转基因小鼠,当椎间盘退变处于早期阶段时(即失去环核边界)[图4 b]和端板浅层的轻微破裂[图4 d]),我们观察到外环细胞变大变圆,但II型胶原蛋白表达不强(图4,B与A的比较).这些数据,以及12个月大的婴儿的数据Col2a1-Smurf2转基因小鼠显示成纤维细胞分化为软骨细胞的程度与椎间盘退行性分化程度平行。
CTGF在大鼠椎间盘组织中表达升高Col2a1-Smurf2转基因小鼠
考虑到CTGF在软骨细胞成熟中的作用,22,26,28伤口愈合,纤维化疾病,19,17腰椎间盘结构缺损附近瘢痕组织和纤维化的形成Col2a1-Smurf2可能是由于CTGF表达水平的增加。为了验证这一假设,我们通过免疫组织化学、Western blot和实时RT-PCR分析检测了腰椎间盘中CTGF的表达水平。6月龄WT小鼠标本抗CTGF抗体免疫染色显示外环成纤维细胞样细胞表达中等水平的CTGF (图5),内环和边界细胞中几乎检测不到这种染色。在相应的区域与年龄相匹配Col2a1-Smurf2然而,在外环由成纤维细胞样细胞分化而来的软骨细胞样细胞和增大的内环细胞中,CTGF的表达水平要高得多,这些细胞通常是小而球形的(图5 b).到10个月时,这些变化在内环更明显,即该区域的软骨细胞样细胞更圆,CTGF染色更强(图5 d).
为了证实免疫组化结果,我们分析了转基因小鼠和野生型小鼠新鲜分离的椎间盘细胞中CTGF蛋白和mRNA的水平(图5 e).Western blot结果显示,CTGF (36 - 38kd)蛋白水平8在6和10个月大的椎间盘细胞中Col2a1-Smurf2显著高于相应的WT对照组(图5 e).同样,CTGF在类似转基因盘状细胞中的mRNA水平比相应WT对照高3倍(图5克).此外,10月龄WT小鼠的CTGF蛋白和mRNA水平略高于6月龄WT小鼠,10月龄和6月龄转基因小鼠(图5E和G),提示CTGF表达水平随着年龄和退行性程度的增加而增加,这与先前在人和小鼠椎间盘中的结果一致。6,33,38
鉴于TGFβ在多种细胞中诱导CTGF表达的能力,19,21,38我们检测了tgf - β mRNA水平是否升高Col2a1-Smurf2转基因圆盘细胞与WT对照细胞的比较。事实上,与WT对照细胞相比,在6个月大的小鼠的转基因盘状细胞中检测到TGFβ1 mRNA水平的微小但显著的增加,而不是8个月大的小鼠(图5 f).
讨论
在骨关节炎发展的过程中Col2a1-Smurf2转基因小鼠,44,45内半月板软骨样组织在年轻和成年小鼠中表现出类似的变化,包括基质降解和钙化,而外半月板根是滑膜和囊附近的纤维化组织,在老年小鼠中表现出软骨形成和骨化(图1 f).结果表明,转基因小鼠的半月板变性是关节软骨变性的原发性而非继发性后果,因为关节软骨和半月板的变性几乎同时发生和进展。
鉴于半月板和椎间盘之间的相似性,半月板的退行性表型Col2a1-Smurf2转基因小鼠促使我们对转基因小鼠的椎间盘表型进行研究。通过比较细胞表型、基质组成和结构Col2a1-Smurf2转基因小鼠圆盘与不同年龄的WT对照组(无花果。- - - - - -4),我们发现WT小鼠的椎间盘发生了生理性老化,并且Smurf2的异位表达受到Col2a1启动子加速了3-6个月的衰老过程,导致椎间盘退变。尽管啮齿类动物椎间盘退变模型由于高细胞密度和成年核中脊索细胞的存在,对椎间盘修复的倾向增加,Col2a1-Smurf2转基因小鼠表现为慢性椎间盘退变表型。在该小鼠模型椎间盘退变的发展过程中,我们观察到许多微观变化,如成纤维细胞向软骨细胞分化、细胞克隆、迁移和纤维化,与人类相似。2,7,33这些相似性可能归因于以下原因:1)异位Smurf2的表达水平由Col2a1启动子的Col2a1-Smurf2转基因小鼠的软骨细胞仅比WT对照组多2.6倍,45这可能刚刚超过Smurf2在椎间盘细胞中表达的阈值水平,可以启动与椎间盘老化或退变进展相关的某些分子事件。2)异位表达Smurf2的细胞Col2a1启动子为内环的软骨细胞样细胞Col2a1-Smurf2转基因小鼠和老龄转基因小鼠外环分化的软骨细胞样细胞。因此,环细胞大多处于老旧状态Col2a1-Smurf2转基因小鼠呈软骨细胞样并表达转基因Smurf2在人类退行性椎间盘细胞中观察到的特征类似,其中内环和核细胞都是软骨细胞样。7,10,33
考虑到CTGF通过促进细胞粘附、迁移、增殖以及基质生成和纤维化形成在伤口愈合和纤维化疾病中的作用,10,17,19我们推测退行性椎间盘的表型改变,如软骨细胞样细胞簇、软骨组织向细胞核迁移、纤维化样组织的形成(图3)可能是原位细胞或易发生退行性或纤维化组织的细胞中CTGF水平升高的结果。正如预期的那样,CTGF染色更强,CTGF蛋白和mRNA水平更高Col2a1-Smurf2转基因盘比WT对照盘(图5).与CTGF表达模式一致的是,同一转基因圆盘中检测到的TGFβ mRNA水平高于WT对照圆盘(图5 f),尽管增幅很小或并不显著。这一发现可能归因于以下情况:由于转录后机制,TGFβ的表达水平并不总是与其在基质环境中的生物活性多肽水平相关;25,32CTGF通过增强TGFβ与其受体的结合而提高TGFβ活性。1总的来说,当结构缺陷发生在椎间盘退变的早期阶段时,椎间盘细胞试图通过激活软骨细胞成熟和基质生成来启动修复CTGF基因的表达。然而,由于再生的软骨组织不能抵抗来自日常活动的机械负荷,其结果可能是结构破坏的扩大和持续CTGF表达,最终导致椎间盘瘢痕和纤维化。
结论
控制下Smurf2异位表达Col2a1小鼠启动子通过加速与年龄相关的椎间盘老化过程诱导椎间盘退变。此外,还观察到成纤维细胞-软骨细胞分化、软骨细胞克隆、纤维化组织形成等表型变化Col2a1-Smurf2在人类中经常检测到转基因退行性椎间盘,并且在这些软骨细胞样细胞中CTGF蛋白和mRNA水平上调Col2a1-Smurf2转基因光盘。因此,我们的研究结果表明,smurf2介导的椎间盘退变是通过上调CTGF发生的,这一途径可能代表了人类椎间盘退变发生或进展的新机制。
致谢
本研究由NIH/NINDS的Jason H. Huang博士(R01 NS067435)、Baylor Scott & White Plummer和Baylor Scott & White Equipment资助。Col2a1启动子由Yoshihiko Yamada (NIH/NIDCR)提供;FLAG-tagged人类Smurf2cDNA购自Addgene。本研究的研究数据由Randy Rosier (University of Rochester)广泛审阅并支持出版。该手稿被Quoc-Bao Nguyen (Texas A&M College of Medicine)广泛审阅。
披露的信息
作者报告在本研究中使用的材料或方法或本文中指定的研究结果不存在利益冲突。开云体育世界杯赔率
作者的贡献
概念和设计:两位作者。数据获取:吴。数据分析和解释:两位作者。文章起草者:吴。批判性地修改文章:两位作者。审稿提交版本:两位作者。代表两位作者:吴审定了稿件的最终版本。统计分析:吴。行政/技术/物资支持:吴。
参考文献
-
1 ↑
阿伯詹,Ketpura倪,ReversadeB,De roberti新兴市场:结缔组织生长因子(CTGF)通过BMP和TGF-β调节细胞信号传导.细胞生物学4:599- - - - - -604,2002
-
4 ↑
安东尼奥由于J,史蒂芬T,纳尔逊F,温特伯顿N,荷兰人美联社,普尔类风湿性关节炎,et al。:人腰椎间盘:细胞外基质在生长、成熟、衰老和退变过程中生物合成和变性变化的证据.J临床投资98:996- - - - - -1003,1996
-
5 ↑
Bandyopadhyay一个,信K,考克斯K,Harfe双相障碍,罗森V,TabinCJ:BMP2、BMP4和BMP7在肢体模式和骨骼形成中作用的遗传分析.公共科学图书馆麝猫2:e216,2006
-
6 ↑
BedoreJ,沙W,麦肯先生,刘年代,Leask一个,·赛甘·CA:脊索特异性缺失CCN2小鼠的椎间盘发育受损和椎间盘过早退变.关节炎感冒65:2634- - - - - -2644,2013
-
7 ↑
嘘声N,Weissbach年代,Rohrbach说道H,维勒C,斯普拉特KF,的观点AG):腰椎间盘年龄相关性改变的分类:2002年沃尔沃基础科学奖.《脊柱》(费城出版社1976年版)27:2631- - - - - -2644,2002
-
8 ↑
BradhamDM,Igarashi)一个,波特RL,GrotendorstGR:结缔组织生长因子:人血管内皮细胞分泌的一种富含半胱氨酸的丝裂原,与src诱导的即时早期基因产物CEF-10有关.J细胞生物学114:1285- - - - - -1294,1991
-
11 ↑
陈米,朱米,阿瓦德H,李特遣部队,张文雄TJ,博伊斯男朋友,et al。:抑制β-连环蛋白信号传导导致出生后软骨发育缺陷.[J]细胞科学121:1455- - - - - -1465,2008
-
12 ↑
张公里,KarppinenJ,陈D,何DW,首歌YQ,虚假的P,et al。:在一项143人的人群研究中,腰椎磁共振成像变化的患病率和模式.《脊柱》(费城出版社1976年版)34:934- - - - - -940,2009
-
13 ↑
科林电子商务,研究生年代,Zeugolis迪,VinatierCS,法国小,GuicheuxJJ,et al。:一种用于髓核细胞治疗的可注射载体.生物材料32:2862- - - - - -2870,2011
-
16 ↑
Girkontaite我,Frischholz年代,LammiP,瓦格纳K,SwobodaB,爱格纳T,et al。:X型胶原蛋白在正常胎儿和成人骨关节炎软骨中的单克隆抗体免疫定位.矩阵杂志15:231- - - - - -238,1996
-
17 ↑
Gruschwitz米,穆勒聚氨酯,然而N,而E,丰塔纳一个,芯G:进展性系统性硬化症皮肤中β型转化生长因子的转录和表达:纤维化的中介?.J投资皮肤油94:197- - - - - -203,1990
-
18 ↑
你好,勒·格拉弗朗国会议员,欧Y,Schield-YeeT,巴克莱l,哈特D,写到T,et al。:兔半月板细胞的排列、相互关系、形态变异和细胞结构.J阿娜特198:525- - - - - -535,2001
-
19 ↑
福尔摩斯一个,亚伯拉罕DJ,Sa年代,上X,黑色的厘米,Leask一个:CTGF和SMAD,硬皮病表型的维持是独立于SMAD信号的.生物化学276:10594- - - - - -10601,2001
-
21 ↑
Igarashi)一个,OkochiH,BradhamDM,GrotendorstGR:人皮肤成纤维细胞和伤口修复过程中结缔组织生长因子基因表达的调控.Mol生物细胞4:637- - - - - -645,1993
-
22 ↑
Ivkovic年代,尹废话,PopoffSN,SafadiFF,Libuda德,斯蒂芬森钢筋混凝土,et al。:结缔组织生长因子在骨骼发育过程中协调软骨形成和血管生成.发展130:2779- - - - - -2791,2003
-
25 ↑
文澜足总,DenhezF,KondaiahP,AkhurstRJ:TGF β 1、β 2和β 3的胚胎基因表达模式提示体内不同的发育功能.发展111:131- - - - - -143,1991
-
26 ↑
录像T,NishidaT,ShimoT,小林K,久保T,TamataniT,et al。:增生性软骨细胞特异性基因产物CTGF/Hcs24对培养软骨细胞增殖分化的影响.内分泌学141:264- - - - - -273,2000
-
27 ↑
的观点AG),施莱歇尔艾德,嘘声N:1997年沃尔沃基础科学研究奖得主。人腰椎间盘年龄相关变化的免疫组织学标志物.《脊柱》(费城出版社1976年版)22:2781- - - - - -2795,1997
-
28 ↑
NishidaT,日本久保田公司年代,录像T,久保T,YosimichiG,近藤年代,et al。:CTGF/Hcs24是一种增生性软骨细胞特异性基因产物,可刺激培养的关节软骨细胞增殖和分化,但不刺激肥大.J细胞生理学192:55- - - - - -63,2002
-
29 ↑
奥卡河米,日本久保田公司年代,近藤年代,江口T,黑田C,KawataK,et al。:结缔组织生长因子(CCN2/CTGF)在继发性骨化中心形成过程中的基因表达与分布.细胞化学55:1245- - - - - -1255,2007
-
32 ↑
。佩德罗佐哈,施瓦兹Z,戈麦斯R,Ornoy一个,W,达拉斯SL,et al。:生长板软骨细胞通过潜伏TGF-β 1结合蛋白-1在基质中储存潜伏转化生长因子(TGF)-β 1.J细胞生理学177:343- - - - - -354,1998
-
34 ↑
PostacchiniF,Bellocci米,Massobrio米:衰老过程中纤维环的形态学改变。大鼠超微结构研究.《脊柱》(费城出版社1976年版)9:596- - - - - -603,1984
-
37 ↑
蜀B,李特遣部队,李XF,唐DZ,张Y,史问,et al。:软骨细胞特异性抑制β-连环蛋白信号导致小鼠尾椎发育不良.《脊柱》(费城出版社1976年版)38:2079- - - - - -2084,2013
-
38 ↑
Tran厘米,MarkovaD,史密斯他,SusarlaB,PonnappanRK,安德森DG,et al。:椎间盘髓核CCN2/结缔组织生长因子表达的调控:Smad和激活蛋白1信号的作用.关节炎感冒62:1983- - - - - -1992,2010
-
39 ↑
Verdonk个人电脑,福赛斯RG,王J,AlmqvistKF,VerdonkR,一新兴市场,et al。:人膝关节半月板细胞表型的表征.骨关节炎软骨13:548- - - - - -560,2005
-
40 ↑
冯·德马克K,樱桃酒T,的观点一个,与库一个,WeselohG,GluckertK,et al。:人骨关节炎软骨中X型胶原蛋白的合成。指软骨细胞肥大.关节炎感冒35:806- - - - - -811,1992
-
44 ↑
吴问,黄JH,桑普森呃,金KO,Zuscik乔丹,奥基夫RJ,et al。:Smurf2诱导GSK-3β降解并上调软骨细胞中β-catenin: Smurf2诱导关节软骨变性的潜在机制.Exp Cell Res315:2386- - - - - -2398,2009
-
45 ↑
吴问,金KO,桑普森呃,陈D,阿瓦德H,O ' brienT,et al。:转基因小鼠中Smurf2诱导骨关节炎样表型和磷酸化Smad3的降解.关节炎感冒58:3132- - - - - -3144,2008