C沟通神经外科医生和病理学家之间的联系对于术中决策和患者护理的优化是强制性的。1自发展以来，肿瘤活检的冷冻切片分析已成为神经外科医生在术中评估病变的标准做法。然而这种方法是侵入性的，依赖于神经外科医生对组织的物理提取。病理学家对这些样本的冷冻切片准备和诊断评估的过程发生在手术室(OR)之外，通常需要大约20-45分钟，有时更长。2术中会诊时的差异也可能发生在组织活检不准确或不充分、冷冻切片制备方法造成的伪影以及肿瘤区域异质性导致的采样误差。3.- - - - - -6
目前，远程医疗主要用于克服医疗保健的地理障碍。7，8远程病理学包括使用数字病理系统来加速外科医生和病理学家之间的通信，以便在医院环境之外进行远程诊断;然而，这些通信主要涉及并依赖于冻结的部分。为了克服与冷冻切片相关的限制，我们使用共聚焦激光显微内镜(CLE)实现了远程病理。CLE是一种新型手持式内窥镜成像方式，可在细胞分辨率下提供组织的体内可视化。9- - - - - -11术中使用与发射光源的激发能量相匹配的荧光团获得CLE图像。CLE允许通过笔大小的成像探针获得的光学活检实时进行组织病理学评估，而不需要物理提取组织样本。一种基于荧光素的CLE系统最近获得了美国食品和药物管理局(FDA)的许可，可在体内术中用于人类脑肿瘤手术。12该技术使用了一种创新的外科远程病理软件平台(TSP)，在使用CLE的神经外科医生和病理学家之间建立了实时、远程和安全的基于网络的通信。TSP和CLE的结合可能会增强神经外科医生和病理学家之间的术中沟通和工作流程，以提高手术决策效率。
我们描述和评估了我们的经验，将TSP和CLE集成到手术工作流程中，用于神经外科医生和病理学家之间的虚拟术中咨询和讨论。我们评估了在某些阶段CLE应用持续时间的差异，以及标准组织学切片程序和手术远程病理学方式之间的诊断准确性。
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研究设计和患者群体
在2020年5月至2021年6月期间，亚利桑那州凤凰城圣约瑟夫医院和医疗中心的巴罗神经学研究所进行了一项前瞻性研究，以评估CLE成像(CONVIVO, Carl Zeiss Meditec AG)和TSP (Zeiss CONVIVO体内病理套件，Carl Zeiss Meditec)在脑肿瘤手术患者中的联合使用。这些患者构成了30名患者中的最后11名，他们参加了一项研究，以评估在TSP可用时，首个fda批准的神经外科体内CLE系统的可行性。开云体育app官方网站下载入口这项研究得到了圣约瑟夫医院和医疗中心的机构审查委员会的批准。
需要切除脑部病变的成年患者在提供自愿知情同意治疗后被纳入本研究。排除标准为1)有荧光素钠(FNa)过敏史，2)肾功能衰竭，3)患者年龄< 18岁，4)怀孕或正在哺乳，5)无法提供知情同意。在CLE显像前5分钟内静脉注射5 mg/kg FNa。CLE的最佳成像参数，光学活检采集的FNa剂量，以及CLE的诊断准确性先前有报道。13，14参与手术的外科医生在肿瘤切除或CLE成像时没有使用宽视野荧光素引导技术(如FNa或5-氨基乙酰丙酸)。FNa注射仅用于CLE组织询问。CLE的光学活检部位的选择仅基于外科医生的主观判断，即感兴趣区域(ROIs)在手术显微镜下可见为病理，没有任何额外的荧光滤镜。
TSP和CLE在外科工作流程中的串联集成
当神经外科医生在手术室(即外科工作场所)获得CLE图像时，图像同时传输到基于云的平台(即病理工作场所)(图1)．病理咨询医师使用TSP在病理工作场所和手术室之间建立远程连接;在获取CLE图像时，同时在两个地方显示。TSP功能依赖于外科工作场所的CLE、病理工作场所和病理学家的数字设备之间的安全互联网连接。现场控制单元(SCU)确保数据传输的安全，它是TSP的一部分，仅在TSP使用时集成到医院网络中。前端连接包括通过互联网和SCU将CLE站的活体术中图像传输到病理工作场所。SCU提供端到端数据加密功能，并提供2个网络接口，将安全的内部网络与可访问internet的外部网络隔离开来。这种设置确保了外科工作场所不能连接到外部网络或internet。后端连接涉及允许病理学家访问病理工作场所的身份验证和授权机制。当病理学家登录到病理工作场所时，SCU不参与，仅在手术工作场所和互联网或云之间进行工作。 From the pathologist’s end, only regular internet access is needed to access the images on the display device.
冷冻切片加工示意图(左)，以及CLE与TSP (正确的)．冷冻切片处理的标准临床方案大约需要20分钟，包括组织样本的冷冻保存、切片、组织学准备和病理学家的评估。CLE和TSP的串联使用允许手术团队和物理位置在手术室外的病理学家之间同步、实时地讨论术中组织组织结构。TSP通过互联网连接和SCU在手术室的CLE站和基于云的病理工作场所之间建立安全连接。显示设备需要互联网接入，以允许病理学家访问基于云的病理工作场所，在那里显示术中CLE数据。经亚利桑那州凤凰城巴罗神经学研究所许可使用。
神经外科医生在会诊开始时让病理学家熟悉患者的病史、手术的大脑位置和假定的病变类型。在暴露病灶期间，神经外科医生要求通过TSP与神经病理学家进行术中会诊。神经外科医生以1.29秒/帧的速度在手术野内生成连续获取的CLE图像。以序列模式获取的单个静止图像存储在CLE设备的内部存储器中，在几秒钟内处理成视频流，并在OR的监视器上显示。CLE探针与术中神经导航系统共同注册，以可视化和记录光学活检位置。病理学家对CLE技术有丰富的经验，并使用数字平板电脑查看视频流CLE图像，同时与手术室的手术团队交谈。对于这些实时会诊，病理学家位于手术室之外(在其他州[1例]，在家[4例]，或在医院病理科[6例])。由于手术团队对roi进行了多次光学活检，病理学家和神经外科医生同时在视频流CLE图像上查看组织组织结构。病理学家对组织结构进行评论和解释。尽管如此，由于本研究是一项试点研究，没有根据该技术确定的结果做出术中临床决策。
CLE数据分析与解释
评估变量包括每个患者的光学活检次数，每个光学活检和每个患者使用CLE的持续时间，以及CLE开始后获得具有可识别组织病理学特征的第一张图像所需的时间。此外，对每个病例进行冷冻切片处理所需的时间进行分析，并确定从组织样本在手术室收集到病理学家完成冷冻切片评估(需要5分钟)的时间。比较了CLE使用时间和冷冻切片处理时间。
病理学家对光学活检的解释是基于视像流CLE成像可识别的组织病理学特征。这些特征分为3类:1)存在大量的细胞异型性或坏死，提示病变组织;2)出现低细胞区、碎片、巨噬细胞和其他反应性细胞，表明非病变或与治疗相关的变化;3)有大量运动或红细胞(RBC)伪影且没有任何可识别的组织病理学特征的光学活检，被分级为不可解释。在6个月后临床试验结束时，病理学家对所有由静止CLE图像组成的光学活检进行评估。
光学和组织活检解释的诊断一致性
对于每一个获得光学活检的ROI，也在仔细考虑安全的情况下收集组织样本。采用冷冻法和永久法对样品进行处理，并进行H&E染色和评价。开云体育世界杯赔率
我们进行了单独的一致性分析，以比较金标准冷冻组织切片分析与基于静态CLE图像和视频流CLE成像的光学活检。在4例病例中，外科医生认为组织活检进行冷冻切片分析是不必要的;因此，永久H&E组织学报告的结果被用于分析。完全一致性被定义为与CLE和冷冻或永久组织学切片相似的组织病理学特征，表明特定组织类型(非典型细胞，反应性脑组织等)。部分一致性的特征是光学活检的发现被认为是组织病理学特征的暗示，这些特征与在冷冻或永久切片上观察到的相似。然而，大量伪影(rbc或运动)的存在使光学活检的解释不确定。不一致被描述为由于运动或rbc产生的伪影扭曲，在光学活检中缺乏确定组织病理学特征，或与冷冻或永久切片完全不同的解释。
统计分析
使用GraphPad Prism 9 (GraphPad Software, Inc.)进行统计分析。连续变量以均值±标准差表示。分类变量被描述为计数(百分比)。采用Mann-Whitney u检验比较CLE使用时间和冷冻切片处理时间。卡方检验用于比较基于静态CLE图像的光学活检与冷冻或永久组织学切片的诊断一致性，以及视频流式CLE成像与冷冻或永久组织学切片的诊断一致性。在这些比较中，被解释为部分一致的CLE活检被纳入不一致组。A p值≤0.05被认为是显著的。
结果
描述性分析
11例脑损伤患者——7例女性(64%)和4例男性(36%)——接受了CLE成像和TSP的综合串联切除。最终的组织病理学诊断与4个高级别胶质瘤、3个组织治疗效果和4个其他肿瘤一致(表1)．没有患者出现任何与CLE使用相关的并发症或fna相关的不良反应。
11例有TSP的CLE患者的人口学资料和一般特征
| 情况下没有。 | 最后的诊断 | 性 | 年龄(岁) | FNa剂量(mg) | 光学活组织检查(编号) |
|---|---|---|---|---|---|
| 1 | 乳腺腺癌转移 | F | 83 | 350 | 3. |
| 2 | 间变性星形细胞瘤 | F | 41 | 350 | 1 |
| 3. | 成血管细胞瘤 | F | 38 | 370 | 1 |
| 4 | 脉络膜丛乳头状瘤 | 米 | 79 | 350 | 2 |
| 5 | 成熟畸胎瘤 | F | 34 | 500 | 3. |
| 6 | 胶质母细胞瘤 | 米 | 64 | 500 | 3. |
| 7 | 治疗效果 | F | 42 | 330 | 2 |
| 8 | 治疗效果 | 米 | 55 | 300 | 1 |
| 9 | 胶质母细胞瘤 | F | 44 | 500 | 2 |
| 10 | 治疗效果 | 米 | 68 | 400 | 4 |
| 11 | 间变性星形细胞瘤 | 米 | 49 | 500 | 2 |
视频1。重建病例1 - 6的光学活检的视频流CLE图像(病例6仅显示3个光学活检中的1个)，这些图像是由神经外科医生和病理学家在术中通过串联使用TSP和CLE获得和讨论的。目前，视频流CLE图像没有存储在云中，如果需要，也不能在手术过程中进行回顾性修改。尽管如此，视频流图像可以通过第三方软件在几分钟内轻松重建。只有CLE生成的数字图像才能在采集后在CLE站上存储和查看。在病例1中，神经病理学家认为所有3个光学活检均为非典型组织结构的病变，前2个解释为提示转移性肿瘤细胞。在病例2中，具有非典型组织结构的病变组织的光学活检被认为高度提示高级别胶质瘤。病例3显示具有非典型组织结构的病变组织的光学活检。在病例4中，神经病理学家确定光学活检显示带有非典型性组织结构的病变组织充满了肿瘤细胞。病例5显示了具有非典型组织结构的病变组织的光学活检。病例6，光学活检显示不典型组织结构的病变组织充满肿瘤细胞，高度提示高度胶质瘤。 Yellow areas show atypical lesional histoarchitecture, and arrows point to tumor cells. Used with permission from Barrow Neurological Institute, Phoenix, Arizona. Click在这里查看。
视频2。神经外科医生和病理学家通过串联使用TSP和CLE，在术中获得并讨论了病例6 - 11(包括病例6的第二次和第三次光学活检)的光学活检视频流CLE图像。病例6，光学活检显示不典型组织结构的病变组织充满肿瘤细胞，高度提示高度胶质瘤。在病例7中，神经病理学家认为两个光学活检都是无损伤的，低细胞组织结构与治疗相关的变化一致。在病例8中，显示了与治疗相关变化一致的低细胞组织结构的非病变组织的光学活检。病例9，第一次光学活检被解释为非病变组织，具有与治疗相关变化一致的低细胞组织结构;第二种被解释为具有非典型细胞组织结构的病变组织，因为肿瘤细胞占主导地位，并伴有治疗相关的改变。病例10中，神经病理学家发现所有4例光学活检均为无损伤性，低细胞组织结构与治疗相关变化一致。病例11，第一次光学活检显示不典型组织结构的病变组织;第二张显示不典型组织结构的病变组织充满肿瘤细胞，高度提示高度胶质瘤。黄色区域为非典型病变组织结构，绿色区域为非病变低细胞组织结构，箭头指向肿瘤细胞。 Used with permission from Barrow Neurological Institute, Phoenix, Arizona. Click在这里查看。
图2显示光学活检采集和冷冻切片处理的持续时间。在病理学家指导下使用CLE系统的平均时间为1±0.3分钟/例，0.25±0.23秒/例。第一张具有可识别的组织病理学特征的图像在6±0.1秒内获得。冷冻切片处理时间为23±2.8分钟，明显长于CLE使用时间(1±0.3分钟)(p < 0.001)。
散点图显示每个病例获得CLE光学活检和冷冻切片处理的持续时间。平均而言，CLE获得光学活检不超过1分钟/例。的虚线表示1分钟截止时间。
CLE光学活检的解释
在24个基于视像流CLE成像的光学活检解释中，16例(67%)被确定为病变，其组织结构特征提示9例活检中确定的特定肿瘤类型，而8例(33%)被确定为非病变(表2)．在基于静态CLE图像的光学活检解释中，7例(29%)被确定为病变(4例被认为提示特定肿瘤类型)，5例(21%)可能为病变，8例(33%)为非病变，4例(17%)不可解释。
光学活检与冷冻或永久切片解释的比较
| 情况下没有。 | 光学活组织检查(编号) | 解释 | 仍然CLE vs冻结/永久H&E | 视频流CLE vs冻结/永久H&E | Intraop决定＊ | ||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 仍然继续教育 | Video-Flow蜡烛 | 冷冻/永久H&E | |||||
| 1 | 1 | Lesional;具有泡沫状细胞质的非典型肿瘤细胞__ | Lesional;具有泡沫状细胞质的非典型肿瘤细胞__ | 乳腺腺癌转移的不典型肿瘤细胞片粘蛋白 | + | + | 切除或活检 |
| 2 | Lesional;具有泡沫状细胞质的非典型肿瘤细胞__ | Lesional;具有泡沫状细胞质的非典型肿瘤细胞__ | + | + | 切除或活检 | ||
| 3. | 大概lesional;红细胞与可能的肿瘤细胞 | Lesional;非典型肿瘤细胞__ | ± | + | 切除或活检 | ||
| 2 | 1 | 大概lesional;红细胞与可能的肿瘤细胞 | Lesional;非典型肿瘤细胞‡ | 间变性星形细胞瘤;浸润性肿瘤细胞具毛样特征 | ± | + | 切除或活检 |
| 3. | 1 | 大概lesional;红细胞与可能的肿瘤细胞 | Lesional;非典型肿瘤细胞 | 成血管细胞瘤;非典型空泡细胞的增殖 | ± | + | 切除或活检 |
| 4 | 1 | 无法解释的;红细胞和运动伪影 | Lesional;非典型肿瘤细胞 | 脉络膜丛乳头状瘤;具有上皮特征的非典型细胞呈乳头状结构排列 | − | + | 切除或活检 |
| 2 | 无法解释的;红细胞和运动伪影 | Lesional;非典型肿瘤细胞 | − | + | 切除或活检 | ||
| 5 | 1 | Lesional;含有折射物质的异常组织 | Lesional;非典型肿瘤细胞 | 囊性畸胎瘤;骨头碎片，脂肪和头发混在一起 | + | + | 切除或活检 |
| 2 | Lesional;含有折射物质的异常组织 | Lesional;非典型肿瘤细胞 | + | + | 切除或活检 | ||
| 3. | Lesional;含有折射物质的异常组织 | Lesional;非典型肿瘤细胞 | + | + | 切除或活检 | ||
| 6 | 1 | 大概lesional;提示红细胞丰富的非典型细胞 | Lesional;不典型特征与肿瘤一致__ | 胶质母细胞瘤;星形细胞瘤伴高度多形性细胞和多核 | ± | + | 切除或活检 |
| 2 | Lesional;细胞性肿瘤伴轴突水肿‡ | Lesional;不典型特征与肿瘤‡一致 | + | + | 切除或活检 | ||
| 3. | 无法解释的;细胞性肿瘤红细胞、运动伪影及特征不明确 | Lesional;不典型特征与肿瘤一致__ | − | + | 切除或活检 | ||
| 7 | 1 | Nonlesional;hypocellular碎片 | Nonlesional;hypocellular碎片 | 大量坏死，与治疗相关改变一致 | + | + | 无需切除或活检 |
| 2 | Nonlesional;hypocellular碎片 | Nonlesional;hypocellular碎片 | + | + | 无需切除或活检 | ||
| 8 | 1 | Nonlesional;退化细胞 | Nonlesional;退化细胞 | 广泛的治疗相关变化;退化细胞 | + | + | 无需切除或活检 |
| 9 | 1 | Nonlesional;神经胶质过多症 | Nonlesional;广泛的神经胶质过多症 | 广泛的治疗相关变化;退化细胞 | + | + | 无需切除或活检 |
| 2 | 大概lesional | Lesional;非典型细胞__ | − | − | 切除或活检 | ||
| 10 | 1 | Nonlesional;hypocellular碎片 | Nonlesional;坏死的神经胶质组织 | 治疗效果;大部分坏死物质和反应性脑实质 | + | + | 无需切除或活检 |
| 2 | Nonlesional;hypocellular碎片 | Nonlesional;坏死的神经胶质组织 | + | + | 无需切除或活检 | ||
| 3. | Nonlesional;hypocellular碎片 | Nonlesional;坏死的神经胶质组织 | + | + | 无需切除或活检 | ||
| 4 | Nonlesional;hypocellular碎片 | Nonlesional;hypocellular碎片 | + | + | 无需切除或活检 | ||
| 11 | 1 | 无法解释的;RBC和运动工件 | Lesional;非典型细胞 | 间变性星形细胞瘤;胶质瘤细胞增殖，具有偏心位置的细胞核和丰富的弱嗜酸性细胞质 | − | + | 切除或活检 |
| 2 | Lesional;细胞质空泡化的非典型细胞__ | Lesional;细胞质空泡化的非典型细胞__ | + | + | 切除或活检 | ||
+ =总诊断一致性;±=部分诊断一致性;−=诊断不一致。
术中决定不是基于CLE视频血流成像的解释。
提示转移。
提示高度胶质瘤。
诊断的一致性
在光学活检和相应的冷冻或永久H&E切片上所见的各种组织病理学特征图3．视频流CLE成像与H&E切片的比较显示，24例光学活检中有23例(96%)完全一致，而1例光学活检中发现不一致(4%)(表2，图4)．当将相同光学活检的CLE图像与冷冻或永久切片进行比较时，24例光学活检中有15例(63%)完全一致，4例(16%)部分一致，5例(21%)不一致。视频流CLE成像在96%的光学活检中正确地解释了组织组织结构，显著高于静态CLE图像的解释准确性(63%)(p = 0.005)。
这项可行性研究探索了肿瘤类型的识别，这些肿瘤类型是CLE组织组织结构可视化的理想候选者。因此，在进行了包括其他肿瘤类型的可行性研究后，必须得出关于CLE成像的最佳肿瘤特征的结论。其他肿瘤必须包括在内，以评估CLE与TSP的疗效和优势。经光学活检证实的组织学特征(左)及相应的h&e染色组织样本(正确的)。答:细胞肿瘤显示散在的不典型细胞，胞浆呈泡沫状(虚线轮廓)，与乳腺腺癌转移相对应。Bar = 60 μm。B:小脑浸润性细胞瘤(虚线轮廓)，与间变性星形细胞瘤一致。的箭头表示血管内有红细胞Bar = 100 μm。C:一种广泛出血性肿瘤，具有与成血管细胞瘤相对应的非典型细胞。Bar = 100 μm。该例血管母细胞瘤患者既往有肾细胞癌病史，并在von Hippel-Lindau病背景下在小脑有第二次病变;因此，CLE-TSP系统的应用具有临床意义。D:坏死的神经胶质组织和分离的肿瘤细胞(箭头)与治疗效果一致。Bar = 100 μm。艾凡:高级别星形细胞性肿瘤，细胞高度多形性，多核表现为胶质母细胞瘤。Bar = 100 μm。F:非典型肿瘤细胞，周围有丰富的嗜酸性细胞质和细胞核(箭头)提示间变性星形细胞瘤。Bar = 100 μm。
视像流CLE成像与静态CLE图像判读和冷冻或永久组织学分析之间的诊断一致性。
讨论
William Mayo和他的病理学主任Louis B. Wilson首次发表了他们的冷冻切片技术，用于加快术中诊断所需的时间。15- - - - - -17威尔逊在1905年的技术只是用亚甲基蓝染色冷冻组织标本，并迅速将诊断解释返回到手术室。18目前，远程医疗已在许多医学和外科专业实施，以提高诊断和患者护理的效率。19最近的研究调查了神经外科特定的远程医疗应用，重点是在选择性神经外科开云体育app官方网站下载入口手术后实施远程医疗转移分诊和随访患者护理。20.- - - - - -24
尽管远程医疗通常用于医患之间的交流，但早在1993年，它也被用于医生之间的交流，特别是在神经外科护理中的成像咨询。25Gray等人1997年的一份报告描述了一种远程医疗网络，该网络允许快速传输放射学图像，以便神经外科医生和转诊医生可以同时通过电话通话查看图像。25目前的技术进步，如TSP，促进了病理学家和神经外科医生在手术室之间进行类似的交流，有助于快速的术中决策。因为CLE产生的光学活检是数字化的，它们可以通过互联网成功地在互联设备之间传输。CLE非常适合与TSP集成，从而产生全数字通信系统。
将TSP集成到工作流程中允许病理学家在手术室中建立实时虚拟存在。TSP显示了协助使用CLE的神经外科医生并在细胞水平上为组织辨别提供咨询服务的可行性。我们研究中的病理学家被告知手术的日期和时间，并在CLE成像开始前不久收到了手术室的通知。与手术室的协调和安全的互联网连接允许病理学家通过个人电脑、平板电脑或智能手持设备远程查看CLE光学活检。因此，TSP不受地理位置的限制，可以灵活地会诊，并在病理学家不在现场时适应紧急情况。
术中决策的TSP
Powsner等人发现，外科医生对病理报告的解释与病理学家的预期含义之间的总体不一致率为30%。26CLE和TSP的串联应用在神经外科医生和病理学家之间建立了更紧密的合作，以快速、最佳的术中光学活检解释。接受采访的两名神经外科医生对TSP技术的评价很高(在1- 5分制中有5分)。TSP被认为是一种非常有用的方法，可以方便地接受有经验的病理学家对组织组织结构的术中咨询。当被问及是否易于接受病理学家的指导时，两位外科医生都对沟通的质量感到满意(1- 5分制中有4分)。在大约1分钟内获得特定ROI的光学活检;到第一张具有可解释的组织病理学特征的图像的平均±SD时间为6±0.1秒。CLE技术对手术室工作流程效率以及外科医生和病理学家之间直接沟通的影响正在研究中。
在目前的发展阶段，CLE还没有被认为是冷冻切片手术的替代品。尽管CLE在侵袭性原发性脑肿瘤的治疗中具有明显的应用价值，但这项可行性研究探索了CLE用于组织组织结构可视化的理想肿瘤类型的识别。本研究病例的多样性是我们有意纳入的结果，目的是了解CLE和TSP在识别不同肿瘤类型方面的可用性。因此，CLE和TSP被应用于各种可能没有获得典型冻结切片的情况。
然而，CLE揭示了在操作显微镜分辨率下无法看到的细胞结构特征。神经外科医生使用CLE实时可视化活体组织结构，而病理学家则使用TSP来协助和指导他们进行组织询问和确定最佳组织采集位置，从而获得更准确的诊断。在视觉上不明显或靠近病变区域的病变可能需要多次组织活检以确定术中诊断并减少采样误差。在这种情况下，TSP是有益的，因为它允许病理学家虚拟出现在手术室，评估组织结构特征，并在需要时要求额外的位置进行光学活检。此外，TSP可能特别有利于指导术中病灶划分区的导航。CLE和TSP可以提高冷冻切片分析的阳性结果率，获得切片所需的时间更短，探索时的组织越界更少。
诊断准确性
CLE的诊断准确性已在临床前和临床环境中进行了研究。27- - - - - -30.使用静态CLE成像来解释脑肿瘤的敏感性在71%到91%之间变化。尽管CLE图像仍然传达了各种组织结构组织特征的信息，但病理学家对其的解释受到评估的回顾性性质的限制。丰富的红细胞往往模糊细胞辨别和可能降低诊断的准确性。根据我们的经验，用于光学活检的视频流式CLE成像比静态CLE图像的解释具有更高的诊断准确性(96%)，因此比静态CLE图像的评估具有显著的优势。尽管CLE不是为组织诊断评估而设计的，病理学家通过当前一代的视频流式CLE成像识别了9例患者的确切肿瘤类型。对这一结果的一种可能解释是，视频流成像增强了对组织组织结构的感知。例如，病理学家可以从肿瘤细胞中区分RBC伪影，因为RBC在运动中，可以在肿瘤细胞保留的情况下从现场被冲洗掉。此外，可以识别血管等结构，以显示血管内的血液流动。在1例(4%)光学活检中，视频流CLE成像与H&E分析之间的诊断不一致。在这个复发性胶质母细胞瘤的病例中，光学活检确定为高级别胶质瘤，而冷冻切片显示出广泛治疗效果的迹象。 The explanation for this discrepancy could be associated with the small scanning field of CLE, which may have scanned a different region of tissue than was harvested.
限制
样本量小可能会影响诊断准确性的可靠性并导致偏倚。纳入更多的病例将增加未来研究的力量。由于CLE探针的扫描范围较小，我们承认可能存在组织采样误差，这可能影响了CLE成像与H&E组织学切片之间的相关性。运动伪影进一步加剧了鉴别病变组织结构的困难。这种限制主要与位于表面的病变有关，可以通过将CLE探针连接到固定支架来克服。
由于用于CLE的荧光素信号依赖于通过血脑屏障渗透性外渗，因此CLE的适用性和有用性取决于肿瘤的组织病理类型。刚接触CLE技术的神经外科医生和病理学家必须克服探针使用和图像解释的学习曲线。在本研究中，外科医生接受了使用CLE的培训，并具有术中使用CLE成像系统的经验。神经病理学家在CLE成像解释方面也有类似的训练和经验。考虑到学习曲线，CLE-TSP系统的一个限制是优化使用、成像解释和准确性所需的技术培训和经验。尽管存在这些局限性，本研究首次定量分析了术中TSP和CLE的联合应用，并指出了这种综合诊断成像过程的可行性。
结论
当与TSP一起使用时，神经外科医生和病理学家可以远程协商，同时实时查看和解释CLE图像，而不需要对组织进行物理活检。同时，该系统可以提高组织采集的准确性。TSP允许神经外科医生接收关于光学检查组织微结构的实时反馈，改善跨功能沟通和术中决策，从而提供比冷冻切片处理显著的工作流程优势。CLE-TSP技术的未来发展应扩大其功能和在神经外科中更广泛应用的潜力。开云体育app官方网站下载入口
致谢
我们感谢巴罗神经学研究所神经科学出版物的工作人员对手稿准备的帮助。
披露的信息
这项研究部分由Preul博士主持的Newsome神经外科研究主席和Barrow神经学基金会资助。开云体育app官方网站下载入口本研究中报告的技术系统由卡尔蔡司医疗集团提供。卡尔蔡司医疗提供了资金来抵消行政研究的成本，但没有参与患者招募、研究绩效、数据分析或本报告中得出的结论。Lawton博士是Carl Zeiss Meditec的顾问。Lawton博士和Carl Zeiss Meditec没有参与本报告中的数据分析或得出的结论。史密斯博士拥有Gammatile的股票;从OsteoMed获得版税;并获得了美敦力公司的临床或研究支持。
作者的贡献
构想与设计:Preul, Abramov。数据采集:Abramov, Park, Gooldy, Xu, Lawton, Little, Porter, Smith, Eschbacher。数据分析和解释:Preul, Abramov, Park, Eschbacher。文章起草人:普劳尔，阿布拉莫夫。对文章进行批判性修改:Preul, Abramov, Eschbacher。审阅提交的手稿版本:Preul。统计分析:Abramov, Xu。研究指导:Preul。
补充信息
视频
之前的演讲
该论文于2022年4月29日至5月2日在宾夕法尼亚州费城举行的美国神经外科医生协会第90届年度科学会议上发表。
参考文献
-
12 ↑
美国食品和药物管理局．K181116．2018年10月25日。访问于2022年4月6日。https://www.accessdata.fda.gov/cdrh_docs/pdf18/K181116.pdf
