已知双静脉闭塞模型对体内缺血半暗带研究是有用的。本研究应用它来检测Bax和Bcl-2蛋白表达的顺序变化,以及在凋亡细胞中评估半暗带与凋亡之间的关系。
在27只Wistar大鼠中,用玫瑰孟加拉染料光化学堵塞两根皮质静脉。在静脉阻塞后4、12、24、48、96和168小时(每间隔4只;另外3只大鼠被假处理)。采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸镍端标记(TUNEL)法对Bcl-2蛋白家族进行免疫组化分析,以检测其与单细胞死亡的关系。
在TUNEL实验中,抗凋亡蛋白阳性细胞在静脉阻塞后24小时死亡的动物中开始出现,在48小时达到峰值。这些细胞分布在梗死中心。Bax蛋白免疫组化染色显示,静脉阻塞后4小时,Bax蛋白在缺血性病变周围的存在增加,并持续增加至24小时,此时Bax蛋白在梗死核心周围弥漫性分布。双静脉阻断后早期Bcl-2蛋白免疫组化阴性。
静脉阻塞后,细胞凋亡在被认为是半暗带的皮层病变中依次广泛出现。因此,控制细胞凋亡有望为静脉梗死的治疗提供一个治疗窗口。
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